Nisl medicamenta sicut cetuximab et panitumumab late adhibita sunt in clinic medicamentis therapeuticis efficacibus pro cancro colorectali. Orci notitia ostendunt aegros mutationes KRAS nullum effectum significantem in hoc medicamento monoclonali anticorpori, et solum aegros silvestres species inde prodesse possunt. Ergo, KRAS gene mutationis status est amet aestimatus est maximus therapeuticus titulus, qui validam habet rationem cum prognosis et curatione effectus cancer colorectalis. The 2009 National Cancer Comprehensive Network (NCCN) Colorectal Cancer Volume Practice Guidelines statuit omnes aegros cum metastatic colorectal cancer KRAS gene mutationis status deprehendere debet, et solum KRAS genus silvestre commendatur ad recipiendum EGFR iaculis justo. Eodem anno, Americanus Societas Oncologiae Fusce (ASCO) etiam eadem commendatione tractationis clinicae edita est quasi hypothetica titulus pro tumore iaculis justo, qui significationem suam magni ponderis ostendit. Nunc, KRAS probatio genetica late peracta amet. Praecipue aestimamus modos detectionis rerum domesticarum KRAS gene mutationis, quae in electione clinica referuntur.
1. A gene mutationem in colorectal cancer positivum rate of KRAS
In colorectal cancer et mutationem in rate XXXV% ad XLV% KRAS gene est quasi princeps et summus periculo est situs mutationem codons XII et XIII in exon II, et adhuc sint rara et ones ut LXI 35 Paramecium tetraurelia site. Sunt multa palam modi est KRAS gene mutationes inter recta scire sequencing, high resolution liquescens linea analysis (HRM), pyrosequencing: quantitatis PCR, mutationem extollendam obstructionum system (amplinc nque) nrefractorymutation system (BELLUM) Dictyostelium discoideum (RFLP) Encephalitis, singlestrand forma analysis discoideum (PCR, singlestrand confomation discoideum (SSCP, PCR), co-ad extollendam denaturation minus temperatur PCR (COLD-PCR) et summus perficientur Fungi aqua analysis, etc.
2. volutpat a KRAS mutationem modi deprehendatur
1. Recta scire sequencing modum: est enim maxime classic modum deprendere parcite KRAS gene mutationes, et etiam non est aurum vexillum quia gene mutationes facilius deprehendamus. Recta scire sequencing et scire sequencing dideoxy modum fundatur in principium maxime potest insito a gene mutatione ostendit ordo in forma basi apicem tabula. Et tremorum genus est in plus, et est etiam prima Ad has deprehensio modum mutationem. Quamvis scire sequencing generation cessum novum tabulatis adlevatae, scholarium domi foris adhuc utor ut metiretur eventus recta scire sequencing in scale et fides novae determinare modum. Gao Jing et al. Applicantur ad recta scire sequencing et palam facti KRAS BRAF CMLXVI gene mutationes in aegris cum colorectal cancer. Haec quoque de analysis de KRAS gene mutationem maximae domesticis et nuntiavit in sample litterae. Ling Yun et alii credere quod est optimum recta modum scire sequencing et palam facti effective ad intellectionem modum uniuscuiusque gene mutationem status, quae possunt rationem penitius elucidare mutationem, maxime ignotum mutationes palam facti. Etsi hunc modum sensus est relative humilis, non potest melius fieri a microdissection ad ditandum modi ut tumore cellulis. De recta scire sequencing modum etiam applicantur ad KRAS palam sample moles maior in domesticis investigationis coetus. Autem, minus recta anima trahitur iniquitas est maximus scire sequencing. Sentio ex nuntiavit eventus in Sina, in directum scire sequencing per mutationem deprehendatur rate est humilis. Liu Xiaojing et al. Fibulae nucleic acidum precursor comparari recta scire sequencing et PCR (PNA, PCR) Et deprehendi XLIII De casibus KRAS gene mutationes in recta sunt deprehensa scire sequencing. In praeter has mutationes, PNA, nequiquam detecta fraude in directum et PCR est scire sequencing. Decem mutationes inventae sunt in solitudine genus et ferox genus agitabanturque determinare de aegris in directum scire sequencing et PCR modum determinare mutant aegris. Tian Qiu et al. CXXXI, nequiquam detecta fraude a colorectal cancer speciminibus a fluorescent PCR optimized oligonucleotide averso specillo diducendum modum modum scire sequencing et directum et positivum rates of mutations in gene KRAS 131% (41.2/54) et 131% (40.5/53)). Bai Dongyu etiam palam de quibus sensitivum modi alia. De colorectal cancer aegris CC, rt-LXIII deprehensis ab ictu mutationes qPCR et mutationem deprehendatur rate erat 200%; CLXIX sunt exemplaria prospere casibus sequenced per L recta scire sequencing et mutationem, mutationem deprehendatur rate 63%. Cum enim recta scire sequencing modum potest verius, ad effectum et secundum speciem deprehendere in KRAS gene mutationem status, et delicta talis ut altus technical requisitis, interdum eget operandi rationes, facile ad facere crucem-contamination, et tempus consumens et laboriosum interpretatio praecessi es quoque valde obvious. Saepe nihil Sequencing instrumento ad specimen indiget debita temptat turmae, quae diu magno sumptu et ita multum nimis.
Pyrosequencing modum:
Pyrosequencing modum esse gene mutationem KRAS et magis convenient ad modum scire sequencing et palam facti sunt in verbis sentiendi vim excitaverunt, et palam facti sumptus ad fama. Et repeatability hunc modum melius. Secundum map adeptus apicem quantitatis et situs et studium ex quadam frequency mutationem in mutationem collatio inter diversis frequentiis in locis patet a glance. In annis, Ogino et al., Et al Hutchins. Have pyrosequencing uti technology test, ut KRAS in aegris cum magna exempla mutationum a colorectal cancer. Eventus indicant pyrosequencing technology est instrumentum potens pro aegris protegendo de Lorem targeted. Tumor hypothetica habet naturam acutius latissime patet prospectus. Quia et domestica usus est scholarium pyrosequencing technology ad mutationes in colorectal cancer amet deprehendere KRAS cum bono et fidem accurate. Et hoc magis habet modum et proprietatem altior sensus imminuerentur. Sundström et al. Utilia comparari allelic PCR pyrosequencing et orci in casibus de applications et inventus ut CCCXIV KRAS mutationes in colorectal cancer aegris est, quod caeteris praestaret ad proprietate pyrosequencing Allelae. PCR, quod bonum est in anima trahitur low textus tumor cellula contentus. Videbantur atq; diluti ratio ut tumore cellulis 314% ad 1.25%. Pyrosequencing deprehendere possumus etiam mutationem annuit. Cum minimum contentus de mutant Allelae pervenire XX% de specimen necessitates, ut detegi posse scire sequencing Sanger, et inveniri potest per modum HRM, quando usque X%, V% et pyrosequencing modo mutationes nobis deprehenditur. Alleles. Non usus ad deprehendere pyrosequencing KRAS DCCXVII mutationes in aegris cum colorectal cancer et inventus est frequency erat 2.5% of mutations KRAS. Et mutationem rate erat 20% Lepisosteus XII et XIII Lepisosteus mutationem rate erat 10%, et LXI Lepisosteus mutationem rate erat 5%. Divites facti sumus et tela altior quam periculo ultimo temptaret microdissection manual a tumore contentus, faciens eventus minus vana. Modum et proprietatem habet bonum sensus, et facile ut develop orci in usu. Iniquo pretio deprehendatur pyrosequencing summus et solus destitutus DNA pro conficiendo processu Sequencing exempla esse gravia. In futuro, pyrosequencing dari possit in progressus in technology in directum, detecto consilio destitutus PCR duplex sit amet, quod operatio magna simpliciorem reddere. Ad consequi a comprehendo promotionem scire sequencing et reducere sumptus de orci temptationis.
3. ARMA modum:
Fera-genus technology utitur Hoc primers distinguere inter genes, et mutant, wh
ich est relatum ut mane ut in 1980s. Maximus commodum de hoc, quod modum habet sensitivum non posse deprehendere usque 1.0% ad 1.0% mutant genes in exempla quam humilis. In consilio scopum longitudo maxima poterit breve est et sagaciter deprehensio problema consequitur ex eo non potest, integer textus specimen paraffin DNA extrahenda est redacta. Hoc technology combines in real-time-closed consequi PCR: illud suggestum in operatio fistula amplificationis causa interponitur. Quod est operatio simplex et non eget, post dispensando a uber quod vitare non potest augeri productum in maxime quantum ad contaminationem. Hoc tempore, et scorpio, combining cruciatus scorpii ARMA modum mutationem systematis obstructionum exaggerandam et amplificandam averso specillo diducendum est communior usus est in mundum. Et sensus compositum ex proprietate utriusque vitae augere possunt. Gao Jie et al. Hunc modum esse gene mutationem status KRAS deprehendere usus est in CLXVII colorectal cancer aegris est, quod nempe in hunc modum constans sit et accurate. Wang Hui et al. Quoque solebat arma deprehendere KRAS CLI mutationes in casibus de formaldehyde, et posuit paraffin embedded, texturis. In Civitatibus Foederatis Americae, ad ornamentum COBAS (Roche) KRAS probatio fidei probatus per FDA in orci et ornamentum Therascreen RGQ (Qiagen) per certified Unionis Europaeae in Vitro Diagnostics (IVD CE) principle omnem usum arma. In communi modi, quod maxime sensitivo arma modum et rationabile pretium est relative. Ideo magnam partem genes KRAS orci palam domi foris sunt, per arma modum et modum, quia fundatur super PCR technology, ejus defectu est quod possit solum esse deprehendi Known situ mutationes.
4. Verus-tempus fluorescens modum quantitatis PCR:
Deprehensio per modum est ad mutationem per Ct valorem determinare. Commoda habet validae specificitatis, altae sensibilitatis, accuratae quantitatis, facilioris operationis, et reactionis plene clausae. Multi coetus experimentales hanc methodum secuti sunt ad deprehendendas mutationes KRAS in cancro colorectali. Comparata cum recta sequencia methodo quantitatis PCR maiorem obtinet utilitatem in sensibilitate. Plerique scholares duos modos comparantes credunt quantitatem PCR sensibilem esse maiorem. Liu Wei et al. Duobus modis usi sunt ad explicandas singulas analysin deprehensionis eventuum 280 casuum mutationum generum KRAS cancri colorectalis, 94 casus KRAS generum sequencium mutationum, positivus numerus 33.57% (94/280), e quibus, quantitatis fluorescens real-time PCR positivus 91 casus erat sensus 96.8% (91/94). 186 De casibus generum sequencium silvestrium generum 184 negativis per quantitatis realem tempus PCR, cum specificitate 98.9% (184/186). coincidentia in rate inter fluorescens quantitatis PCR methodum ac modum gene sequendi directum 98.2% fuit. In duobus modis detectionis, positivus et negativus eventus cuiusque mutationis situs supra 90% erant, et accidit rate quattuor situs ad 100%. Deprehensio eventus duorum modorum valde constantium est, indicans quantitatis fluorescentium PCR Est modus certius deprehensio mutationis. Nihilominus, per rationes fundatae, opus est ad primarios designandum et pervestigationes ex notis mutationis generibus, ideo omnes mutationes possibilium deprehendi non possunt, et solum speciales situs deprehendi possunt. Si locus quidam in ornamenti deprehensione non comprehenditur, etiam si mutatio fit, ornamentum evenit adhuc negativum. Praeterea, licet sensibilitas quantitatis PCR alta sit, utrum falsae sint positivas, adhuc verificandae sunt per DNA technologiam sequelam, vel experimentorum clinicorum retrospectivorum et prospectivorum magnis magnitudinibus ad confirmandam correlationem inter KRAS status mutationis et efficaciam iaculis medicinae. Summus igitur sensus mutationis deprehensionis caeca prosequi non debet, specificitas et subtilitas deprehensionis negligi debet. Sub diversis condicionibus laboratorium, optima methodus mutandi deprehendendi in speciminibus etiam alia esse potest. Specimina cum altiori proportione mutationum, Sanger methodum sequendi modum altiorem accurationem habet in detegenda mutationum generum, dum ad specimina cum inferiori proportione mutationum, Sanger methodum sequen- tionis falsae negationes fieri possunt, et detectio methodus fluorescentium per modum technicae utens. summus sensus potest distingui.
5. HRM modum:
Quod est usitatius est in gene deprehendatur modi annis. Est autem simplex habet commoda, ieiunium, sensitivo et una fistula ne pollutio. Ut explorarent hoste agitari coeptum in usum orci temptationis, Liu Liqin et cetera ad usus HRM modum esse gene mutationes in deprehendere KRAS LXIV colorectal cancer aegris est, tum recta usus scire sequencing ut quin eventus. Eventus HRM recta scire sequencing et inventi sunt quod consistent. Cum recta scire sequencing et palam facti KRAS a gene mutationes et HRM accurate simplex est, quod sibi vult a orci test enim certius idoneam. Chen Zhihong et al. HRM methodo usus exempla quae mixto variis rationibus probare KRAS ordine mutant sensum perpendere lactis. Quod inventum est, ut inaequalitas numeri lactis mixta exempla mutationum in X% eius; et animorum pervenit X%. Exim Flacco Pomponio modum esse gene mutationes ad deprehendere KRAS in LX TEXTUS exempla colorectal cancer. Cum recta modum scire sequencing et HRM modum sentiendi de esse ad C%, quod erat ad proprietate% XCVI (64/10). In praeiudicium HRM ad modum sit, qui non est impossibile est providere verius est specifica type mutationem mutatur et quae Lepisosteus. Si deprauationem in invenitur liquantibus est curva ad determinare opus est, scire sequencing modum mutationem genus. CLVI Härle investigationis coetus in usum colorectal cancer casibus conferre TEXTUS fluorescent PCR, arma HRM modi. Eventus tamen suadeant ut idoneae evadant ad actiones trium modi orci temptationis, commendatio proventus est ut bonum quod HRM alia duo modi.
6. Alii modi:
In praeter praedicta modi, alii palam modi habet sua commoda et incommoda in application, ut PCR, SSCP, summus perficientur liquido Fungi, fluorescent PCR, optimized oligonucleotide averso specillo diducendum modum, Methodo fecerunt nidos PCR et armis combination: GRAVEDO-PCR modum, etc. High fortis perficientur ius habet fina proprietatem, sed est magnum demanda per exempla; PCR est SSCP humilis-sumptus, et in oeconomica, sed multiplex est operatio; ad mutationem deprehendatur technology secundum fluorescent PCR est fortis proprietatem, princeps sensus et accurate quantitatis, facile operatio, plene clausus reactionem et alia commoda: sed omne opus, ad excogitandum deterget et speculatoria secundum notas mutationem genus, et solum specifica sites potest esse nequiquam detecta fraude et deprehendi nisi morte non possunt mutationes.
3. summary
In summary, quia mutationem situs et palam facti modi in diversis laboratorios demonstra non uniformis, in mole summo tumore effundunt specimina resolvitur et ex species DNA extraction quoque inaequalitate percutiat, unde fit quod magnum et parvum experimentalem results inter laboratorios demonstra differentiarum in standardization a gene mutationem KRAS palam fiet in has deprehensio orci in variis exitus de in terris. Hoc tempore, sunt plures modi deprehendi mutations in gene KRAS. Sensibilitas ex acuta facta est gravis est ARMIS DISCEDO, pyrosequencing, HRM, real-time quantitatis PCR, scire sequencing et directum. A orci re, anima trahitur low orci est non conducere ad curatio, sed etiam sensitivo declines ad proprietate modi ego faciam palam, et necesse fieri, ut eventus falsus positivum afficit in patientes estote et subsequent est scriptor medicamento regimen. Adversus super facies, combined per modum probatus per FDA inter arma enim modum suadetur. Scilicet, in forum ex perspective, vehementiusque non sit mecum maligno diagnostic
thods, sed finalem rectam eventum intendunt. Diversae laboratoriae opportunis methodis probationibus secundum condicionem actualem assumere possunt, sed tantum si qualitates bonas operatores habent et qualitatem internam rationum temperantia. Sub hodiernis condicionibus laboratorium domesticum environmental, necesse est ut probatio in normatis PCR laboratorio exsequatur, ac domesticae et internationalis intercellae qualitates dicionis actionis participet ut certas qualitatum probationis officinas curet. Administratio normaizata condicio necessaria est ut continuos effectus conservet. In Sinis, urgente necessitate est probatio clinica KRAS gene examinare et normatum generare ac normatum et normatum probationis programma secundum varias necessitates generare, et haec progressio ad detectionem BRAF, PIK23450_3CA, EGFR et extendi potest. alia gena ad pathologiam hypotheticam clinicam promovendam temptationem.
